ELISA tests ir laboratorijas medicīniskā pārbaude, kuras veikšanas laikā notiek tā sauktā antigēna-antivielu reakcija. Var pārbaudīt dažādus antigēnus, kuriem ir nozīme cilvēku vai veterinārajā medicīnā. Tikai akreditēti laboratorijas institūti ir pilnvaroti veikt testu Vācijā.
Kas ir procedūra?
Laboratorisko medicīnisko pārbaužu ietvaros ELISA tests pieder pie tā sauktajām imunoloģiskajām procedūrām. Izmantojot testa procedūru, olbaltumvielas molekulas var atklāt diezgan atšķirīgi ķermeņa šķidrumi. ELISA ir saīsinājums no enzīmu saistītā imūnsorbenta testa. Tāpēc tas ir angļu valodas apzīmējums, kas tomēr ir nostiprinājies vācu medicīnas lietojumā. ELISA tests pieder pie tā sauktajām imunoloģiskajām procedūrām laboratorisko medicīnisko pārbaužu ietvaros. Pārbaudes procedūru var izmantot olbaltumvielu noteikšanai molekulas visdažādākajos ķermeņa šķidrumi. To atklāšana molekulas savukārt ļauj izdarīt secinājumus par noteiktām slimībām vai klīnisko ainu, tāpēc arī ārsti savu diagnozi nosaka atkarībā no šāda ELISA testa rezultāta. Tāpēc testa procedūrai ir liela nozīme ikdienas klīniskajā praksē neatkarīgi no tā, vai tā notiek ambulatorā vai stacionārā. Attiecīgais ķermeņa šķidrumi, piemēram, vesels asinis vai šķidrumi no savienojumi, tiek nosūtīti uz laboratoriju tūlīt pēc savākšanas no pacienta. Parasti tie ir diezgan steidzami paraugi, jo vietējais materiāls tiek uzskatīts par jutīgu un tas jāpārbauda pēc iespējas ātrāk. Tā sauktie overstore paraugi var vadīt uz viltus negatīviem rezultātiem, jo patoloģiski proteīni atklātas ir tikušas samazinātas vai pilnībā degradētas. Tādējādi tā dēvētajiem preanalītiskajiem līdzekļiem ir liela nozīme ELISA; aizdomīgi vai negatīvi rezultāti jāatkārto vēlreiz, ja ir atbilstoši klīniskie simptomi.
Funkcija, ietekme un mērķi
Pareizai testa veikšanai akreditētā medicīnas laboratorijā absolūti nepieciešamas mēģenes un tā dēvētās mikrotitera plāksnes. Šīs plāksnes ar smalkiem daļēji ieliektiem ievilkumiem ir izgatavotas no īpašas plastmasas un katra ir pārklāta ar ļoti specifiskām antivielām. Ja atklājamais antigēns atrodas pārbaudāmajā ķermeņa šķidrumā, tad notiek specifiska antigēna-antivielu reakcija saskaņā ar tā dēvēto slēdzenes un atslēgas principu. Parauga materiālu laboratorijās var ievietot vai nu manuāli, izmantojot pipetes, vai arī pilnībā automātiski. Mūsdienu laboratorijas medicīnas institūtos ELISA diagnostikai tiek izmantotas tikai pilnībā automatizētas sistēmas. Tomēr tās jāuzrauga apmācītam personālam, medicīniski tehniskiem laboratorijas palīgiem. Par tā saukto iekšējo un ārējo kvalitātes kontroli atbild arī laboratorijas personāls, kas ir augstāks par medicīnas personālu par laboratorijas medicīnu infekcijas slimība epidemioloģija un mikrobioloģija. Pēc pirmās testa partijas, ti, pēc tam, kad materiāls ir pipetēts uz plāksnēm, paraugā esošie specifiskie antigēni, ja tādi ir, jau ir piesaistījušies antivielas uz plastmasas plāksnes. Pēc tam tiek veikta mazgāšana ar fizioloģisko fizioloģisko šķīdumu, lai noņemtu traucējošos faktorus, piemēram, nevēlamus antigēnus vai proteīni no sagatavošanās. Šis solis ir ļoti svarīgs, lai izvairītos no viltus pozitīvām reakcijām. Viltus pozitīvs rezultāts, ko interpretē laboratorija, var izraisīt letālas sekas pacientam. Testa otrajā posmā pievieno vēl vienu antivielu, kas ir savienota ar fermentu. Šī marķētā antiviela arī saistās ar antigēnu. Trešajā un pēdējā posmā tiek pievienots īpašs krāsviela noteiktā daudzumā, kuru lielākā vai mazākā mērā noārda joprojām esošie enzīmu atlikumi. Noārdīties var tikai tādu fermentu, kas iepriekš nebija saistīts ar antigēnu kopā ar antivielu. Brīvais ferments spēj sašķelt pievienoto krāsvielu. Precīzu šķeltās krāsas daudzumu var precīzi noteikt ar citu laboratorijas metodi, tā saukto fotometriju. Tas ļauj izdarīt precīzus secinājumus par to, vai antigēns vispār ir parauga materiālā, un, ja ir, tad cik daudz. ELISA testu izmanto ne tikai sākotnējai diagnozei vai noteiktu slimību aizdomīgu diagnožu un klīnisko attēlu apstiprināšanai, bet arī uzraudzīt viņu progresu. Ja antigēns koncentrācija testā kļūst zemāka terapija, terapija tiek uzskatīta par veiksmīgu.
Riski, blakusparādības un bīstamība
ELISA tests savu informatīvo vērtību iegūst galvenokārt, atklājot antigēnu struktūras ķermeņa šķidrumos. Tests ļauj tā saukto kvalitatīvo, bet arī daļēji kvantitatīvo un kvantitatīvo paziņojumu par aizdomām par noteiktu antigēnu klātbūtni ķermeņa šķidrumos. Vesels asinis testam nevar izmantot, tikai asins serumu. Tiešs tests pacientam, piemēram, no kapilārs asinis no pirksta galu, līdzīgi kā ar dažiem citiem seroloģiskajiem testiem, līdz šim nav iespējams. Cilvēku medicīnā ELISA testu galvenokārt izmanto baktēriju, vīrusu vai sēnīšu infekciju antigēnu noteikšanai. Turklāt visi hepatīts seroloģiju vēlreiz pārbauda ar standarta ELISA testu. Noteikti hormoni, piemēram, grūtniecība hormonu HCG, var noteikt arī ar ELISA testu. Ja laikā rodas noteiktas komplikācijas grūtniecība, precīzas zināšanas par koncentrācija grūtniecības hormona līmenis asinīs ir ļoti noderīgs diagnostiski un terapeitiski. Vēl viena testa indikācija ir tā saukto paraproteīnu noteikšana urīnā, jo tie sastopami, piemēram, dažādās audzēju slimības, piemēram, multiplā mieloma. ELISA tests joprojām tiek veikts daudzās laboratorijās, taču eksperti to uzskata par novecojušu. Imūnā reakcija kopā ar fermenti ELISA testā pēdējos gados arvien biežāk tiek aizstāts ar radioaktīvi marķētiem antivielas, kas nodrošina vēl labāku kvantitatīvo mērījumu rezultātu. Šos testus sauc arī par RIA, radioimūnsorbentu testu. Citi specifiski ELISA sasniegumi ir vieglās ķīmiskās metodes, piemēram, luminiscence vai fluorescence.
