Fluorescences in situ hibridizācija (FISH) ir ģenētiskā skrīninga metode DNS (dezoksiribonukleīnskābe) atsevišķu šūnu kodolos.
Šī metode ietver specifisku DNS zondu izmantošanu, kas var sniegt informāciju tikai par genomiskajiem reģioniem, kuriem izmantotā zonde ir specifiska.
Indikācijas (pielietojuma jomas)
- Aizdomas par skaitlisku hromosomu aberāciju:
- Skaitlisko hromosomu patoloģiju noteikšana (piemēram, 21. trisomija).
- Mozaīkas kvantitatīvai noteikšanai hromosomu aberācijām (piem.,Tērnera sindroms).
- Mikrodelēciju noteikšana (piemēram, monosomija 22q11.2).
- Hromosomu aberāciju noteikšana (piemēram, hroniska limfoleikoze (CLL), ne-Hodžkina limfoma).
Iepriekš minētās indikācijas analizē starpfāžu FISH (sīkāku informāciju sk. “Laboratorijas procedūra”).
procedūra
Nepieciešamais materiāls
- Heparīna asinis (vismaz 1-2 ml)
Pacienta sagatavošana
- Nav nepieciešams
Traucējoši faktori
- Nav zināms
Laboratorijas metode
Fluorescences in situ hibridizācija (FISH) ietver fluorescējoši iezīmētu DNS zondu (FISH zondes) izmantošanu. Tie var saistīties ar noteiktu hromosomas DNS vietu, ko sauc par hibridizāciju. Pēc vai pēc fluorescējoši marķētas zondes saistīšanas novērtēšanu var veikt, izmantojot mikroskopu. Šajā procesā tiek noteikts fluorescences signālu skaits starpfāžu kodolos. Turklāt novērtējums par atrašanās vietu (piemēram, translokācija / atrašanās vietas maiņa / uz citu hromosomu) metafāzē hromosomas ir iespējams.
Kad dažādas fluorescējošas krāsvielas tiek izmantoti dažādām mērķa DNS FISH procedūrā, to sauc par daudzkrāsainu FISH. Tas ļauj pilnībā vizualizēt genomu.
Dažos gadījumos DNS zonde nav tieši marķēta ar fluorescējošu krāsu, ko sauc par netiešu procedūru. Tā vietā tas ir marķēts ar tādām vielām kā biotīns vai digoksigenīns. Šī metode tiek uzskatīta par sarežģītāku, bet tā ir jutīgāka.
