Eritrocītu morfoloģija, fāžu kontrasta mikroskopija

Fāzes kontrasta mikroskopija ir diagnostikas procedūra, ko uroloģijā un nefroloģijā (nieru izpēte) izmanto citomorfoloģisko vitālo paraugu (parauga ar dzīvām šūnām) pārbaudei un novērtēšanai hematūrijā un urīna sedimentu diagnostikā. Šīs metodes izcilā nozīme jo īpaši balstās uz iespēju, kas attiecas uz diagnostiku, novērtēt eritrocītu morfoloģiju (sarkanās asinis šūnas), kas var sniegt vērtīgu informāciju par iespējamās hematūrijas (asinis urīnā) vai eritrociturijas (sarkano asins šūnu urīnā) izcelsmi. Fāzes kontrasta mikroskopija urīna nogulsnes ir ideāli piemērotas, lai novērtētu dažādas urīna formas eritrocīti.Ievads fāzes kontrasta mikroskopija ikdienas diagnostikā var uzskatīt par lielu progresu, jo tas atvieglo patognomonisko urīna komponentu atšķirt no patoloģiskiem artefaktiem. Fāžu kontrasta mikroskopija ir pārāka par gaišā lauka mikroskopiju, kas tika izmantota līdz fāzes kontrasta mikroskopijas ieviešanai attiecībā uz artefaktu diferenciāciju. Ja ir neskaidrs vai nepārliecinošs atklājums, šīs procedūras izmantošana var ietaupīt mazāk noderīgus pasākumus, piemēram, radioloģisko vai cistoskopisko diagnostiku (cistoskopiju) glomerulārās hematūrijas gadījumā (skatīt zemāk), tādējādi samazinot izmaksas un ietaupot ārstēšanas laiku.

Indikācijas (pielietojuma jomas)

Fāzu kontrasta mikroskopija tiek izmantota uroloģijā un nefroloģijā, lai pētītu eritrocītu morfoloģiju:

• Citomorfoloģisko vitālo paraugu novērtējums hematūrijas un urīna sedimentu diagnostikā. Norāde:> 6-8 eritrocīti/ l nosakāms urīnā vai pozitīvas svītras testā. Eritrocītu morfoloģijas kontekstā glomerulārās hematūrijas diferenciāciju no ne-nieru eritrocitūrijas veic, atklājot dismorfu (glomerulāru) un eumorfu eritrocīti.
• Glomerulārās izcelsmes dismorfā hematūrija tiek konstatēta pacientiem ar membrānām un membranoproliferatīvais glomerulonefrīts, kā arī IgA nefropātija, fokālā un segmentālā nefroskleroze un vilkēdes nefrīts. Glomerulārās hematūrijas gadījumā eritrocīti tiek spiesti cauri bojātām glomerulāro kapilāru bazālajām membrānām, izraisot bojājumus. Mikroskopiski var atpazīt dismorfos eritrocītus, kurus dēvē arī par akantocītiem (= eritrocīti ar “Mikija peles ausīm”).
• Eumorfā hematūrija (postglomerulārā hematūrija) tiek konstatēta pacientiem ar nieru cistas ieplīsis dobajā sistēmā, urīnpūslis bilharzija, asinis piejaukums no maksts (maksts), ievainojums pēc a urīnpūšļa katetru, asinis recēšanas traucējumi utt.

procedūra

Fāzes kontrasta mikroskopijas princips ir balstīts uz gaismas staru iejaukšanos mikroskopa staru ceļā, ar kuru var iegūt nekontrolētu šūnu augsta kontrasta attēlu. Fāzes kontrasta mikroskopa struktūra un funkcija:

• Fāzu kontrasta mikroskopa darbībai īpaša nozīme ir gredzenveida apertūrai, kondensatoram, gredzenveida fāzes plāksnei un objektam. Ievietojot gredzenveida diafragmu kondensatorā un fāzes plāksni objektīvā, tiek nodalīti nedalīti un nedalīti gaismas stari. Rezultātā izkliedēto gaismas staru viļņa garuma aizkavēšanās izraisa fāžu starpību, kas optiski liek pārbaudāmā mikroskopiskā objekta strukturālajām detaļām kļūt tumšākām nekā apkārtējā vide. Fiziski fāze trombocīti pārveidot fāzes vai ceļa atšķirības amplitūdas atšķirībās. Šo amplitūdu atšķirību rezultātā objekta attēls parādās mikroskopā, savstarpēji atceļot vai pastiprinot tiešos gaismas starus, kas iet caur objektu un difraktē pie objekta.
• Tādējādi šī principa trūkums ir fakts, ka ideāli fāzes preparāti nav noteikums, jo amplitūdas efekti parasti tiek uzklāti uz fāzes efektiem.
• Pamatojoties uz struktūru attēlveidošanas principu pēc amplitūdas atšķirībām, esošās šūnu struktūras tiek attēlotas kā pakāpeniski pelēkas nokrāsas atkarībā no viņu pašu optiskās Blīvums. Lai uzlabotu struktūru reprodukciju, plānu preparātu un fāzes izmantošanu trombocīti ir norādīts. Atkarībā no dažādās fāzes rakstura trombocīti, var panākt gan pozitīvos, gan negatīvos fāžu kontrastus, kā rezultātā interesējošie objekti tiek parādīti vai nu tumšāki, vai gaišāki par apkārtni.
• Fāžu kontrasta mikroskopijā ir vēl svarīgi to atzīmēt nekroze (šūnu nāve) var notikt salīdzinoši ātri gaismas iedarbības un vitāli svarīgo šūnu papildu bojājumu dēļ. Šī straujā rezultātā nekroze izstrādājot, slaidu novērtēšana jāveic vienas līdz divu stundu laikā, lai saglabātu derīguma termiņš diagnostikas pasākuma. Tādējādi šim būtisko paraugu novērtēšanas laika ierobežojumam parasti ir nepieciešama dokumentācija ar fotomikrogrāfiju vai, ja nepieciešams, veicot mikrokinematogrāfiju. Fotomikrogrāfs ir mikroskopiska attēla fotogrāfija, kas uzņemta ar mikroskopam piestiprinātu kameru. Izmantojot mikrokinematogrāfiju, ir iespēja attēlot objektus mikroskopiskā novērošanā kustīgos attēlos.