Viens-gēns analīze ir mērķtiecīga ģenētisko testu metode.
Šīs procedūras ietvaros, ja ir aizdomas par iedzimtu slimību, ko izraisa vienas izmaiņas a gēns, tiek pārbaudīts gēns, kas ir aizdomas par cēloņsakarību. Tas bieži tiek veikts arī regulāri skrīninga izmeklējumu ietvaros.
Indikācijas (pielietojuma jomas)
- Monogēno slimību diagnostika, piem cistiskā fibroze.
procedūra
Nepieciešamais materiāls
- Heparīna asinis (vismaz 1-2 ml)
Pacienta sagatavošana
- Nav nepieciešams
Traucējoši faktori
- Nav zināms
Laboratorijas metode
Visbiežāk sekvencēšanas metode, ko izmantogēns analīze ir Sangera metode, saukta arī par ķēdes gala sintēzi, kur vispirms tiek veikta DNS izolēšana no asinis. Tad visi ūdeņradis saites, kas kalpo divu virkņu DNS saturēšanai kopā, ir sadalītas. Pēc vienas minūtes karsēšanas 94-96 ° C temperatūrā ir divi atsevišķi pavedieni. Pēc tam notiek tā sauktā grunts hibridizācija, pie kuras tiek piestiprināts grunts. Tas notiek aptuveni 60 ° C temperatūrā. Grunts ir oligonukleotīds (oligomēri, kas sastāv no dažiem nukleotīdiem), kas kalpo par sākumpunktu DNS replikācijai fermenti piemēram, DNS polimerāze. Pēc grunts hibridizācijas notiek pagarināšana, kurā temperatūra tiek paaugstināta līdz 72 ° C. Tas ļauj grunts pievienoties DNS polimerāzei (fermenti kas sintezē DNS). Pēc vidēji 30 cikliem procedūru var pārtraukt.
Turpmāku analīzi veic kapilārs elektroforēze automātiskajos sekvenceros. Rezultātu sauc par elektroferogrammu. Tas parāda dažādas krāsas, kas norāda bāzes secību.
Ar šo metodi var noteikt mutācijas, kas gēnā ietver tikai vienu nukleīno bāzi, kas pazīstamas arī kā punktu mutācijas.
