Saldētas sekcijas analīze
Tas ir nepieciešams, ja ķirurgam nepieciešama informācija par operācijas laikā izņemtajiem audiem, lai lemtu par procedūras gaitu. Piemēram, neliels ļaundabīgs audzējs tiek noņemts no niere. Tagad ir nepieciešams veikt ātru iegriezumu, lai redzētu, vai audzējs ir pilnībā noņemts, vai arī audu paraugu malās joprojām ir liels daudzums ļaundabīgu audu.
Galu galā iesaldētās sekcijas pārbaudes rezultāts nosaka operācijas gaitu un pacienta turpmāko terapijas plānu. Kā notiek iesaldēta sekcijas pārbaude? 10 minūšu laikā audi tiek stabilizēti, sasaldējot -20 ° C temperatūrā, pēc tam uz tā saukto mikrotomu tiek veikts 5 - 10 μm biezs iegriezums. Tas tiek novietots uz slaida, mazas stikla plāksnes un ātri nokrāsots. Beigās konstatējumus pārbauda mikroskopā, un rezultātu var nekavējoties pārsūtīt uz operāciju zāli.
Krāsošanas metodes
Pēdējo 120 gadu laikā ir izstrādātas daudzas histoloģiskas krāsošanas metodes. Šūnu struktūras un audi tiek sadalīti bazofilās, acidofilās un neitrofilās šūnās, pamatojoties uz krāsu reakciju ar krāsošanas līdzekļiem. Turklāt pastāv arī agyrofilās un nukleofilās struktūras.
Bazofīlie traipi satur visu, kas satur skābes grupu un krāso ar bāzisku krāsu (piemēram, hematoksilīnu vai metilēnzilo). Acidofilās struktūras ir bāziskas, un tāpēc tās var krāsot ar eroziju vai skābu fuksīnu (skābes krāsvielas). Tie ietver citoplazmu un Kolagēns šķiedras.
Neitrofilie vai lipofilie komponenti nespēj reaģēt ne ar skābu, ne ar bāzisku krāsu, tāpēc tos nevar krāsot. Agyrofilie komponenti var saistīt sudraba jonus un pārveidot tos par elementāro sudrabu. Nukleofilā (kodols = šūnu kodols, šūnu kodolu mīlošā) krāsu reakcija rodas no nukleofīlām krāsvielām šūnas kodols. Tās ir DNS saistošas vai bāzes vielas, kas saistās ar nukleīnskābēm.
Mūsdienās labi izmēģinātās ķīmiskās krāsošanas metodes ir papildinātas ar imunoloģiskām metodēm. Šajā metodē antigēna-antivielu reakcija tiek izmantota noteiktu šūnu īpašību noteikšanai. Pēc tam reakciju var padarīt redzamu, izmantojot izsmalcinātu tehniku.
Bieži lietotās krāsošanas metodes ir: HE krāsošana = krāsošana ar hematoksilīnu un eozīnu: dabiskais krāsviela hematoksilīns visas struktūras krāso zilā krāsā, kas ir bazofilas (= bāzes mīlošas) un tāpēc skābas, piemēram, DNS, šūnu kodoli, ribosomasSavukārt eozīns tiek ražots sintētiski. Eozīns nokrāso visas šūnu struktūras sarkanā krāsā, ja tās ir acidofīlas (= skābes mīlošas) vai bāziskas.
Jūsu darbs IR Klientu apkalpošana proteīni citoplazmas, mitohondriji, un Kolagēns ir viņu vidū. Azana krāsošana: to veido abu krāsu pirmie burti, azokarmīns G un anilīna zilgani zelta oranžs: šūnas kodols un muskuļu šķiedras ir sarkanas, un citoplazma ir sarkanīga. Kolagēns un tīklveida šķiedras šajā krāsojumā kļūst zilas.
Lai notraipītu, tiek izmantots Giemsa traips (Giemsa's Azure-Eosin-Methylene Blue) asinis šūnu uztriepes. Šūnu kodolus var viegli atpazīt pēc violetas krāsas reakcijas. Citoplazmas traipi ir zilgani.
Elastikas krāsošanā (rezorcīna-fuksīna-orceīna) visas elastīgās šķiedras ir attēlotas melnā violetā krāsā. Van Giesona krāsošanas metodi raksturo fakts, ka krāsošanu vispirms veic ar hematoksilīnu. Tad tiek izmantots pikrīnskābes fuksīns (mikrofuksīns) vai pikrīnskābes tiazīns.
Galu galā šūnu kodoli izskatās melni tumši brūni, citoplazma šķiet diezgan gaiši brūna. Pretkontrastēšana ar pikrīnskābes tiazīnu iekrāso elastīgās šķiedras un muskuļu audus oranži dzeltenā krāsā, bet kolagēna šķiedras - sarkanā krāsā. Trichroma krāsošanā saskaņā ar Masson-Goldner, krāsošanas molekulas lielums ir vissvarīgākais krāsošanas metodes faktors.
Tiek izmantots dzelzs hematoksilīns, parasti ar trim papildu krāsvielām, proti, skābes lapsu, apelsīnu G un gaiši zaļu. Tas iekrāso kolagēnu saistaudi un gļotas zaļas, šūnu kodoli zili melni, citoplazma sarkana, muskuļi gaiši sarkani un sarkani asinis šūnas (eritrocīti) oranžsarkans. Turklāt ir Grama krāsošana, kas kalpo, lai atšķirtu baktērijas.
Grampozitīvs baktērijas ir iekrāsotas zilā krāsā, un gramnegatīvās baktērijas - sarkanā krāsā. Ziehl-Neelsen krāsošana tiek izmantota arī baktērijas, proti, tie, kas ir izturīgi pret skābēm un, piemēram, parāda tuberkuloze patogēni sarkanā krāsā. Citas krāsošanas metodes, kas šeit jāpiemin, ir Berlin-Blue reakcija, kas ir atbildīga par trīsvērtīgo dzelzs jonu noteikšanu audu sekcijās, un dzelzs hematoksilīna krāsošanas metode saskaņā ar Heidenhainu.
